把細胞系養好的三個關鍵要素是:良好的細胞來源,正確的實驗操作,以及合適的培養體系。其中“合適的培養體系"就是要創造適合細胞生長的環境,給細胞建立一個滿意的“家"。
細胞培養基本條件:
1.合適的細胞培養基
合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。
2.血清
目前,大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。
3.細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養溫度要求也不同。人體細胞培養的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡。
4.無菌無毒細胞培養環境
無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。因此,在體外培養細胞時,必須保持細胞生存環境無菌無毒,及時清除細胞代謝產物。
5.恒定的細胞生長溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恒定適宜的溫度。
6.合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
7.合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環,產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。