其實歸納總結下來，ELISA的操作步驟也不過就那么幾個，每個步驟及關鍵注意點都熟練掌握之后，實驗就會顯得容易簡單多了。今天的實驗技術內容中，上海晶抗公司對ELISA檢測步驟加樣的要求進行著重介紹：
在ELISA檢測實驗中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。
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