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許多試劑檢測都涉及到標準曲線的問題,標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到馬生長激素(GH)ELISA試劑盒實驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標準曲線呢?
做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。